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qPCR实验结果分析基本步骤（一）
发布时间： 2021-10-15 点击次数： 11446次实时荧光定量PCR实验会产生大量实验数据，一般可以用PCR仪自带的软件进行收集、分析。但即使有了方便可靠的软件，我们也需要对原始数据进行检查、再分析，评估数据的质量和可靠性。
这需要三个基本的步骤。
第一步，查看扩增曲线，有必要时调整基线和阈值。
Ct值由基线和阈值计算得来，所以他们的值对结果影响很大。软件会给出1个默认的基线和阈值，但不一定是最合适的，需要我们进行手动调整。
首*行基线的调整。
一般范围是循环数3～15，使得靶基因的扩增信号大于背景噪声。出现不正常的扩增曲线，通常是因为设置了不正常的基线，需要对单个孔进行设置。
比较好的做法是，基线的最小值（起始循环数）设置在背景噪声的尾巴后，最大值（结束循环数）设置为扩增起始点。
循环范围在5个循环就可以，具体跟扩增曲线的对数图来设定。
扩增曲线的对数图是什么？下期告诉你
- 下一篇：qPCR实验结果分析基本步骤（二）
- 上一篇：qPCR实验中探针和引物有什么区别？
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